Kalkulačka koncentrace proteinů

Autor: Henrick Yau
- July 21, 2026
| |

Kalkulačka koncentrace proteinů

Typické hodnoty se pohybují od 0,5 do 2,0
Standardní kyvety mají délku dráhy 1 cm
Pokud byl vzorek před měřením naředěn (např. 5 = ředění 1:5)

Koncentrace proteinu pomocí absorbance při 280 nm (A280) se stanovuje pomocí Lambert-Beerova zákona:

\[ C = \frac{A}{\epsilon \times l} \]

kde:

  • \( C \) = Koncentrace proteinu (mg/mL)
  • \( A \) = Absorbance při 280 nm
  • \( \epsilon \) = Extinkční koeficient (L·g⁻¹·cm⁻¹)
  • \( l \) = Délka dráhy kyvety (cm)

Co je kalkulačka koncentrace proteinu?

Kalkulačka koncentrace proteinu pomáhá určit koncentraci proteinu pomocí různých metod, včetně:

  • Absorbance při 280 nm (A280): Rychlá a nedestruktivní metoda založená na aromatických aminokyselinách.
  • Bradfordova metoda: Kolorimetrická metoda využívající vazbu barviva.
  • BCA (Bicinchoninová kyselina) metoda: Metoda založená na redukci mědi a kolorimetrické detekci.
  • Lowryho metoda: Osvědčený přístup využívající interakce protein-měď.

Jak používat kalkulačku

Pro výpočet koncentrace proteinu postupujte podle těchto kroků:

  • Vyberte metodu měření (A280, Bradford, BCA nebo Lowry).
  • Zadejte požadované hodnoty, jako je absorbance, faktor ředění a extinkční koeficient (pokud je potřeba).
  • Pokud používáte metodu standardní křivky (Bradford, BCA nebo Lowry), zadejte parametry křivky.
  • Klikněte na tlačítko "Vypočítat" pro získání výsledku koncentrace.

Výhody používání kalkulačky

  • Šetří čas automatizací výpočtů koncentrace.
  • Podporuje více metod měření pro flexibilitu.
  • Obsahuje kalkulačku ředění pro přípravu specifických koncentrací.
  • Snižuje lidské chyby při ručních výpočtech.

Často kladené dotazy (FAQ)

1. Jak přesná je metoda absorbance (A280)?

Metoda A280 je obecně přesná pro čisté proteiny, ale může být ovlivněna kontaminanty, jako jsou nukleové kyseliny.

2. Mohu použít Bradfordovu metodu pro všechny proteiny?

Bradfordova metoda funguje dobře pro většinu proteinů, ale může poskytovat proměnlivé výsledky v závislosti na složení proteinu.

3. Jaká je výhoda BCA metody?

BCA metoda je kompatibilnější s detergenty a má širší lineární rozsah než Bradfordova metoda.

4. Jak vybrat správný extinkční koeficient pro A280?

Použijte publikované hodnoty pro známé proteiny nebo vypočítejte extinkční koeficient na základě složení aminokyselin.

5. Proč potřebuji faktor ředění?

Pokud je váš vzorek před měřením naředěn, musíte vypočítanou koncentraci vynásobit faktorem ředění, abyste získali správnou konečnou koncentraci.